Алкалоиды - производные индола
окислителями. Наиболее важно окисление азотной кислотой, при котором
происходит образование динитрострихнона. Долгое время его считали
производным хинолина или изохинолина, но при дальнейшем окислении вещества
был получен динитроизатин (III), что доказывало наличие индольного ядра в
молекуле (2).
[pic]
Далее, было доказано, что один из кислородных атомов имеет карбонильный
характер, связан с азотом, индифферентен, и в то же время нейтрализует
связанный с ним атом азота. Второй атом кислорода также индифферентен (2).
Стрихнин и бруцин дают бензилиденовые производные, реагируют с азотистой
кислотой, давая изонитрозопроизводные (IV). Эти реакции доказывают наличие
реакционноспособной метиленовой группы (1).
[pic]
Алкалоиды содержат одну двойную связь, которая легко гидрируется с
образованием дигидрострихнина и дигидробруцина. При более энергичном
восстановлении были получены тетрагидрострихнин, стрихнидин,
дезоксистрихнин, дигидрострихнолин (1).
Исследования формулы стрихнина продолжались более ста лет со времени его
открытия, и только в 1950 г. была предложена структурная формула, которая
объясняла все его превращения. Эта структура была подтверждена в 1954 г.
Вудвордом (США) с помощью синтеза (1).
2.1.10. Качественный анализ.
Фармакопейный качественный химический анализ сырья чилибухи заключается
в открытии стрихнина и бруцина.
Хлороформное извлечение порошка семян фильтруют через фильтр с безводным
сульфатом натрия, делят на 2 части и упаривают на водяной бане досуха. К
одной части сухого остатка прибавляют раствор бихромата калия и осторожно
по стенкам чашки – концентрированную серную кислоту. При покачивании чашки
появляются красно-фиолетовое окрашивание – стрихнин. К другой части сухого
остатка прибавляют концентрированную азотную кислоту, появляется оранжево-
красное окрашивание – бруцин. Также можно проводить анализ на срезах семян
чилибухи: при смачивании обезжиренного среза каплей концентрированной
серной кислоты со следами ванадата аммония содержимое клеток тотчас же
окрашивается в фиолетовый цвет. При смачивании среза каплей дымящей азотной
кислоты, содержимое клеток окрашивается в оранжево-желтый цвет (15).
Нефармакопейные реакции на стрихнин.
С нитритом натрия и серной кислотой стрихнин дает грязно-желтое
окрашивание, которое после добавления спиртового раствора едкого кали
переходит в оранжево-красное; при добавлении же водного раствора едкого
кали сначала появляется коричневато-зеленая окраска, переходящая в красно-
коричневую.
В концентрированной азотной кислоте стрихнин дает желтый раствор,
остаток после выпаривания при прибавлении аммиака окрашивается в оранжево-
желтый цвет, такая же окраска получается и от прибавления водного или
спиртового раствора едкого кали. Водный раствор вызывает оранжевую окраску,
которая изменяется потом в желтую, зеленую, красноватую и, наконец,
исчезает (12).
Стрихнин в чистых препаратах дает характерные кристаллические осадки со
многими реагентами. Наиболее пригодными для микрохимического открытия
стрихнина являются: 1) пикриновая кислота, 2) реактив Майера, 3) бихромат
калия, 4) железосинеродистый калий, 5) реактив Беттендорфа, 6) пикролоновая
кислота, 7) четыреххлористый свинец и некоторые другие реактивы (2).
С 1%-ным раствором пикриновой кислоты раствор азотнокислого стрихнина,
подкисленный уксусной кислотой, дает мелкокристаллический осадок в виде
круглых зернышек, которые после недолгого стояния срастаются в перьевидные
агрегаты. Эта реакция очень чувствительна.
При смешении на предметном стекле 0,1%-ного раствора азотнокислого
стрихнина, подкисленного разведенной соляной кислотой, с раствором
К4[Fe(CN)6] (1:10) выпадает обильный кристаллический бледно-желтый осадок,
часть кристаллов срастается в виде крыльев или их обломков (12).
Насыщенный спиртовой раствор пикролоновой кислоты с 0,1%-ным раствором
азотнокислого стрихнина дает быстро кристаллизующийся осадок в виде
веточек.
Четыреххлористый свинец с подкисленным соляной кислотой раствором
азотнокислого стрихнина дает быстро кристаллизующийся осадок. Быстрота
образования кристаллов зависит от концентрации раствора алкалоидов; 0,5%
раствор азотнокислого стрихнина образует с этим реактивом в большинстве
случаев кристаллы перьевидных форм, а 0,1 и 0,05%-ные растворы алкалоида –
кристаллы призматической формы или в виде пластинок. При действии этих
реактивов на настойку чилибухи получаются аморфные осадки, за исключением
реакции с К4[Fe(CN)б], с которым образуется кристаллический осадок в виде
чешуек (1).
При взаимодействии на предметном стекле капли азотнокислого стрихнина с
каплей свежеприготовленного 1%-ного раствора соли Рейнеке образуется
аморфный осадок, который вскоре переходит в кристаллический в виде
дендритов и игл.
При добавлении к капле азотнокислого стрихнина капли 10%-ного раствора
платинохлористоводородной кислоты, через 5 – 10 мин выпадают бесцветные
призмы и кристаллы, напоминающие форму конвертов (12).
Нефармакопейные реакции на бруцин.
Чистый препарат бруцина с концентрированной азотной кислотой дает
кроваво-красную окраску, которая постепенно переходит в красно-желтую и
желтую. При прибавлении к желтому раствору раствора хлористого олова
(SnCl2) или гипосульфита (Nа2S2O3) появляется фиолетовое окрашивание (12).
Бруцин, как и стрихнин, дает ряд характерных микрокристалличесикх
реакций.
При добавлении к капле азотнокислого бруцина капли 10%-ного раствора
платинохлористоводородной кислоты, через 5 – 10 мин выпадают кристаллы
игольчатой формы.
От прибавления капли насыщенного раствора пикролоновой кислоты к капле
раствора хлористоводородного бруцина сначала образуется бледно-желтый
аморфный, а затем, при стоянии, кристаллический осадок в виде звезд и
пучков из мелких пластинок (2).
При добавлении к капле солянокислого бруцина капли 1%-ного
свежеприготовленного раствора антраниловой кислоты, выпадают интенсивно
желтые пластинки и призмы с двусторонними концевыми гранями.
При взаимодействии на предметном стекле капли раствора солянокислого
бруцина с каплей 1%-ного раствора палладиевохлористоводородной кислоты
образуются кристаллы в виде игл и пластинок желтого цвета (12).
2.1.11. Количественный анализ.
Количественное определение суммы стрихнина и бруцина в сухих препаратах.
Навеску (1 – 7 г) порошка обезжиривают петролейным эфиром, помещают в
склянку емкостью 200 мл с притертой пробкой и заливают 50 мл эфира, 25 мл
хлороформа и 7,5 мл раствора аммиака. Полученную смесь в течение часа часто
и сильно встряхивают. 50 мл отстоявшегося эфирохлороформного слоя
фильтруют через сухой хорошо прикрытый фильтр диаметром 10 см в коническую
колбу емкостью 150 мл. Фильтр промывают два раза эфирохлороформной смесью,
присоединяя фильтрат к основному объему жидкости. Растворитель отгоняют
досуха. Остаток растворяют в 5 мл спирта, прибавляют 15 мл воды, 3 капли
метилового красного и титруют 0,1 н. раствором соляной кислоты до розового
окрашивания.
1 мл 0,1 н. раствора соляной кислоты, израсходованной на титрование,
соответствует 0,0364 г смеси равных частей стрихнина и бруцина (15).
Определение стрихнина в препаратах (порошке).
Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют при нагревании в
нейтрализованной по фенолфталеину смеси, состоящей из 30 мл спирта и 15 мл
хлороформа, и при постоянном взбалтывании титруют 0,1 н. раствором едкого
натра (индикатор фенолфталеин).
1 мл 0,1 н. раствора едкого натра, израсходованного на титрование,
соответствует 0.03974 г стрихнина нитрата (12).
Определение стрихнина нитрата в ампулах. К 10 мл препарата прибавляют 1
каплю раствора метилового красного и по каплям 0,02 н. раствора едкого
натра до перехода красной окраски в желтую.
К нейтрализованному раствору добавляют 10 мл спирта, нейтрализованного
по фенолфталеину, и титруют 0,02 н. раствором едкого натра (индикатор 5
капель фенолфталеина). 1 мл ''02 н. раствора едкого натра соответствует
0,007948 г стрихнина нитрата (12).
Колориметрический метод определения малых доз стрихнина нитрата (по
Соболевой). 1 мл раствора, содержащего 0, 001 г соли алкалоида, доводят
водой до 4 мл, прибавляют 4 мл соляной кислоты (удельный вес 1,12) и
1 – 2 г цинковой пыли. После окончания бурной реакции смесь нагревают на
водяной бане до прекращения выделения водорода и оставляют до полного
охлаждения, после чего быстро фильтруют через смоченную водой вату в мерную
колбу на 50 мл, в которую предварительно внесено 2 мл соляной кислоты
