Биологическая характеристика возбудителей вирусных трансфузионных гепатитов
могут функционировать как матрицы для синтеза вирусной мРНК и синтеза плюс
РНК полной длины, новосинтезированная вирусная ДНК – полимераза и белок –
затравка для синтеза минус – цепи ДНК собираются в комплекс с мажорным
структурным полипептидом в сердцевины вируса и образуют сердцевину или
нуклеокапсид вируса. Затем внутри нуклеокапсида синтезируется минус – цепь
вирусной ДНК. В этом процессе используется белковая затравка и РНК
матрица, которая по мере синтеза ДНК деградирует под действием РНК азы Н.
на матрице минус – цепи ДНК кольцевой конформации синтезируется плюс – цепь
вирусной ДНК. Затем частицы сердцевины собираются в полные вирионы с HBcAg
и липидосодержащими оболочками клеточной мембраны. В случае HBV
формирование вируса и выделение его из клетки могут, происходить, очевидно,
на любой ступени после сборки сердцевины, так как вирионы (частицы Дейна)
содержащие молекулы гибридов ДНК – РНК, а также частично одноцепочечные
кольцевые ДНК обнаруживаются в крови. Эндогенное ДНК полимеразы в вирионах
катализируют включение нуклеотидов в минус – цепи ДНК гибридов РНК – ДНК и
в плюс - цепи ДНК частично одноцепочечных молекул [15].
1.2.6 Чувствительность HBV к физико – химическим факторам.
Характеризуется значительной устойчивостью, при t = -20Со сохраняется
до 20 лет, не инактивируется при замораживании – оттаивании, сохраняется
при 56 Со около суток, а при 60 Со – 30 минут. Антиген устойчив к
воздействию протеолитических ферментов и органических растворителей. Под
действием эфира, хлороформа, 1,5% формалина, 2% р-ра фенола не
инактивируется несколько часов. При t = 100 Со надо несколько минут, чтобы
убить вирус. В сыворотке сохраняется 6 месяцев при 30 – 32 Со. после
высушивания вирус сохраняет жизнеспособность при 25 Со около недели. При
процедуре фракционирования плазмы по Кону, большая часть HBV, HBeAg, ДНК –
полимеразы сохраняется в первой фракции (фибриноген, фактор - восемь) или
во фракции три (протромбиновый комплекс), тогда как большая часть HBsAg
перемещается во фракцию четыре (плазматических белков), а меньшее
количество во фракции три и пять (альбумин). После прогревания HBV до 60Со
в течении 4 часов вирус не инактивируется, 10 часов при 60 Со ликвидирует
его. При 98 Со инфекционность сыворотки частично устраняется через 1 минуту
или полностью через 20 минут. Сухой жар 160 Со разрушает инфекционность
через час. В другой серии опытов HBV в течении 10 минут обрабатывали при 20
Со одним из пяти дезинфицирующих препаратов (гепатохлоридом натрия + 500 мг
свободного активного хлора на 1 литр; Cidex СХ – 250 + 2% водный р-р
глутаральдегида, рН – 8,4; Sporicidin рН – 7,9 + 0,12% - ный глутаральдегид
и 0,44% - ный фенол; 70% - ным изопропиловым спиртом; Weskodine,
разведенным 1:213 и содержащим 80 мг активного йода на 1 литр) и затем
вводили одному шимпанзе. Ни у одного из пяти не было отмечено признаков
заболевания. На конец отмечено, что обработка вета – пропилактоном + УФ –
лучами уменьшает титр HBV в плазме приблизительно в 10 млн. раз [14,15].
1.3 Вирус гепатита D
Впервые обнаружил Ризетто в 1977 году в гепатоцитах во время вспышки
сывороточного гепатита в Южной Европе. Позднее стали выявлять повсеместно.
Возбудителем заболевания является дефектный вирус с размерами вириона
35 – 37 нм. Систематизирован в состав Deltavirus семейства Togaviridae.
Внутренний компонент частицы состоит из РНК с относительной молекулярной
массой 500.000. прослеживается четкая связь между HBV и DAg. DAg является
саттелитом HBV; HBsAg которого всегда является внешней оболочкой вируса
гепатита D. Таким образом, полноценный вирус D состоит из РНК, внутреннего
антигена (YDAg) – собственно вируса гепатита В и его внешней оболочки,
состоящей из HBsAg. Геном гепатита D кодирует лишь один известный продукт –
фосфопротеин, обладающий антигенными свойствами [2].
Вирус гепатита D термоустойчив, УФ – облучение инфекционную активность
не уменьшает. Надежно убивается при автоклавировании в режимах, аналогичных
для HBV. Погибает при кипячении не раньше, чем через 5 минут [14].
1.3.1 Пути передачи HDV
Передается D-инфекция парентерально, с зараженной кровью. Часто она
встречается у больных с гемофилией, у лиц, имеющих контакт с кровью.
Резервуаром HDV является инфицированный человек. Заражающая доза для D-
гепатита существенно меньше, чем у HBV и составляет всего 10-11 мл
вируссодержащей крови. Вирус HDV по содержанию в биологических жидкостях
уступает HBV, но все они считаются потенциально опасными. Возможно также
передача HDV при половых контактах (гетеросексуальные ( 50%,
гомосексуальные более 90%). Есть возможность передачи HDV от матери к
ребенку, большая при родах, меньшая – при кормлении грудью [10].
Среди животных резервуар пока не обнаружен. Распространение HDV
коррелирует с уровнем выявления HBsAg. Среди носителей HBV около 5% (от
0,1% до 20 – 30%), населения инфицировано HDV. Наибольшая зараженность в
странах экваториального и тропического климата. Эндемичной зоной HDV
является Италия и страны Ближнего Востока. По данным С. О. Вязова этот
гепатит широко распространен и в СНГ и чаще выявляется при тяжелых
хронических заболеваниях печени [10,14].
4. Вирус гепатита С
Обнаружен у людей, заболевших гепатитом после переливания крови или ее
препаратов, где отсутствовали маркеры HBV. Это дало основания утверждать,
что существует еще один или несколько возбудителей вирусных гепатитов с
парентеральным механизмом передачи [3].
HCV систематизирован в семейство Flaviviridae, род Hepavirus. Вирион
представляет собой вирус сферической формы, диаметром 55 – 65 нм. Геном HCV
представлен однонитиевой +РНК, протяженностью около 10000 нуклеотидов. HCV
вызывает заболевания только у человека, но в экспериментальных условиях
инфекционный процесс можно воспроизвести только у высших обезьян.
Характеризуется высокой степенью изменчивостью генома (известно 10 – 14
генотипов и более 50 подтипов вируса), по некоторым источникам известно
более 90 субтипов и множественных вариантов вируса, обозначаемой как
квазиды. Зарегистрирована территориальная неравномерность циркуляции
генотипов HCV [6].
Ряд биологических характеристик HCV имеет сходство со свойствами ВИЧ и
служит основанием для изучения возможностей патогенетической роли HCV в
поражении кроветворной системы. К таким биологическим характеристикам
относятся:
1. Высокий уровень спонтанных мутаций;
2. Способность к длительной персистенции в иммунокомпетентных клетках
кроветворной системы, что обуславливает длительное выживание и
дессименацию HCV в организме хозяина и закономерные иммунные
нарушения с появлением значительного количества аутоантигенов [7].
1. Генетическая неоднородность HCV.
Существенной особенностью HCV является его генетическая неоднородность,
соответствующая особенно быстрой замещаемости нуклеотидов. В результате
образуется большое число разных генотипов и субтипов. Они отличаются друг
от друга иной последовательностью нуклеотидов. Наиболее консервативны С –
протеин, а в неструктурной области NS5 - протеин и РНК - зависимая РНК
полимераза. С другой стороны, белки внешней оболочки Е2 / NS1 и Е1 особенно
вариабельны. По началу разграничивали 4 – 6 разных генотипов HCV инфекции.в
последующих классификациях разграничивают 11 генотипов и субтипов HCV,
согласно последним данным Bukh J. Выделяют уже 30 разных субтипов. Особенно
много субтипов HCV регистрируются в Африке и Юго-Восточной Азии. Это
косвенно подтверждает существование HCV в этих регионах уже в течение
нескольких столетий. Допускают, что в Европе и Северной Америке HCV
появился позже, чему соответствует существенно меньшее число разных
субтипов. Для клинической практики достаточно разграничивать 5 субтипов
HCV: 1а, 1в, 2в, 2а, 3а [10].
Установлены существенные географические различия в распространении
разных генотипов. Так , в Японии, на Тайване, частично Китае,
регистрируются преимущественно генотипы 1в, 2а, 2в. тип 1в даже называют
японским. В США преобладает 1а – американский генотип. В европейских
странах преобладает генотип HCV 1а, в Южной Европе заметно возрастает доля
генотипа 1в. в России чаще регистрируется генотип 1в, дальше с убывающей
частотой 3а, 1а, 2а [6,9].
2. Эпидемиология HCV.
HCV как и HBV и HDV относятся к антропонозным трансмиссивным кровяным
вирусным инфекциям. Механизм заражения - парентеральный, пути передачи –
множественные – искусственные и естественные. Допускают и иные, еще не