Класс жгутиковые: лейшмании, трихомонады, лямблии, трипаносомы
взято слишком мало фекалий, то мазок получится разведенным и простейших
можно не обнаружить. Через правильно приготовленный мазок должен быть виден
печатный текст.
Микроскопическое исследование свежего мазка нужно проводить, обязательно
соблюдая следующие правила:
1) освещение препарата не должно быть ярким. Правильное освещение
достигается соответствующим положением конденсора, который
опускают тем больше, чем сильнее источник света. Используют также
светофильтр;
2) препарат просматривают сначала под малым увеличением микроскопа
(X 10), а потом с сухой системой большого увеличения;
3) передвигать препарат надо с таким расчетом, чтобы не пропустить
какие-либо участки мазка или не попасть повторно на уже
просмотренное место.
При правильном освещении даже под малым увеличением можно увидеть
вегетативные стадии и цисты лямблий. После ориентировочного просмотра под
малым увеличением обязательно применяют большое увеличение (х10, х40).
Циста в нативном мазке отличается от вегетативной стадии постоянной
формой благодаря оболочке. Строение цист в нативном препарате плохо
заметно, невидны ядра. Поэтому для уточнения вида применяют мазок,
окрашенный раствором 'Люголя.
Окраска раствором Люголя. Раствор Люголя по унифицированной методике
рекомендуется следующего состава: йодид калия—3. г, кристаллический
йод—'1,5 г, вода дистиллированная — 100 мл. Вначале растворяют йодид калия,
затем йод. Раствор стабилен в темной склянке с притертой пробкой при
комнатной температуре не более месяца.
Цисты окрашиваются в золотисто-коричневый цвет. На фоне цитоплазмы
заметны ядра, их строение и число. Хорошо виден гликоген, окрашивающийся в
разные оттенки коричневого цвета.
Методика просмотра препарата, окрашенного раствором Люголя, такая же, как
и нативного мазка. Следует учитывать, что при окраске раствором Люголя
вегетативные стадии погибают и определяются с трудом.
Так, если фекалии оформленные, то в нативном мазке при микроскопии ( х
400) обнаруживают цисты. Сочетание методов копроскопии и дуоденального
зондирования повышает частоту выявления лямблиоза.
Следует отметить, что широкое распространение лямблии (носительство)
нередко вводит в заблуждение и вызывает гипердиагностику лямблиоза. Поэтому
при наличии клинической картины поражения желудочно-кишечного тракта или
желчных путей необходимо исключить другие возможные причины заболевания,
например провести бактериологические исследования.
Трихомонады.
Виды.
У человека обитают три вида трихомонад (рис. 11):Trichomonas hominis—
кишечная, обитающая в толстом кишечнике; Trichomonas tenax— ротовая,
обитающая в полости рта; Trichomonas vagimalis— влагалищная, паразитирующая
в мочеполовых путях.
[pic]
Рис № 11. Трихомонады
а- трихомонада влагалищная, б- трихомонада кишечная, в- трихомонада
ротовая.
Строение.
Кишечная трихомонада имеет грушевидное тело длиной 8—20 мкм. От
переднего конца тела отходят обычно 5 жгутиков. С одной стороны тела по
всей его длине расположена волнообразна; перепонка (ундулирующая мембрана),
по наружному краю которой про ходит тонкая нить, выступающая своим
свободным концом в виде жгутика. В цитоплазме при окраске видны ядро и
осевая нить. Движение трихомонады активное, беспорядочное, “суетливое”.
Наряду с поступательным движением трихомонады вращаются вокруг продольной
оси. Мембрану удается заметить только при замедлении движения трихомонады
или при ее остановке в виде периодически пробегающих волн по одной из
сторон тела. Размножается делением. Цист не образует. Обитает в толстом
кишечнике человека. В жидких испражнениях может обнаруживаться в очень
больших количествах. В ряде случаев играет определенную роль в развитии или
ухудшении течения заболеваний толстого кишечника, особенно у детей раннего
возраста.
Ротовая трихомонада по строению похожа на кишечную, ее длина 6—13 мкм,
ундулирующая мембрана не достигает конца тела. Цист не образует.
Патогенное значение не доказано, хотя и имеются данные о значительно
более частой встречаемости у лиц с различными заболеваниями полости рта и
зубов (гингивит, пародонтоз, кариес зубов) и о неблагоприятной роли этих
простейших в поддержании патологического процесса. Некоторые исследователи
обнаруживали трихомонад в мокроте больных легочными заболеваниями, а также
в удаленных хирургическим путем бронхоэктазах и абсцессах легких. Все это
заставляет обратить внимание на необходимость более широкого применения
лабораторных методов исследования с целью выявления ротовых трихомонад в
стоматологических и терапевтических медицинских учреждениях.
Трихомонад обнаруживают при микроскопии нативных или окрашенных мазков из
соскоба ротовой полости (с зубов, десен, из очагов воспаления и нагноения),
в бронхиальной слизи и мокроте. Выявляемость увеличивается с применением
методов посева на питательные среды.
Влагалищная трихомонада имеет грушевидное тело длиной 14—30 мкм (см. рис.
12).
[pic]
Рис № 12. Трихомонада влагалищная
I – мазок на культуры,II- мазок из влагалища, III- мазок из влагалища (
окраска метиленовым синим) а- трихомонада: 1 ядро, 2 базальные тельца, 3
передние жгутики, 4 ундулирующая мембрана, 5 аксостиль, 6 парабазальная
нить, 7 лейкоциты. в – эпителиальные клетки.
На переднем конце тело имеет 4 жгутика и ундулирующую мембрану, доходящую
только до середины тела. Ближе к переднему концу располагается ядро. Сквозь
все тело проходит осевая нить (аксостиль), выступающая на заднем конце в
виде шипика. Цитоплазма содержит вакуоли. Цист не образует, во внешней
среде быстро погибает. Играет заметную роль в патологии мочеполовой
системы, особенно у женщин. Наблюдается и длительное бессимптомное
носительство, чаще у мужчин. Основными симптомами заболевания, которое
называется мочеполовым трихомонозом, являются зуд, боль, жжение, серозно-
гнойные выделения (бели).
Трихомонады этого вида передаются лишь половым путем. Иногда
высказываемое мнение о том, что трихомонады могут переселиться во влагалище
из кишечника, неверно, так как кишечная и влагалищная трихомонады — это
разные виды с различными требованиями к условиям среды обитания. Диагноз
ставят при обнаружении трихомонад в выделениях мочеполовых путей методом
микроскопии нативных или окрашенных по Романовскому мазков
Диагностика.
Исследование выделений мочеполовых путей.
При воспалительных заболеваниях мочеполовых путей обязательно
исследование на наличие влагалищных трихомонад.
Патологические выделения у женщин берут для исследования с помощью
влагалищных зеркал и тампона со слизистой оболочки влагалища или из его
заднего свода, а при обилии выделений — с наружных половых органов или с
пальца резиновой перчатки после осмотра больной врачом.
Из уретры получают материал с помощью специальной ложечки, которую вводят
до сфинктера.
У мужчин до мочеиспускания из уретры выдавливают каплю выделений. Для
исследования мочевого пузыря мочу получают катетером и микроскопируют
осадок после ее центрифугирования.
Во всех случаях 1—-2 капли выделений необходимо сразу же поместить в
каплю изотонического раствора хлорида натрия на предметном стекле, накрыть
покровным стеклом и исследовать при среднем увеличении (Х40, х10) с сухой
системой.
В препарате, приготовленном указанным способом, вследствие быстрого
высыхания подвижность трихомонад вскоре прекращается. Поэтому рекомендуют
готовить препарат по типу “висячей капли”. В получающейся при этом влажной
камере, где благодаря вазелиновой прокладке создается герметичность и
замедляется высыхание препарата, подвижность трихомонад может наблюдаться
иногда в течение часа. Это дает возможность готовить препараты в
процедурном кабинете и направлять их в лабораторию (в холодное время года
препараты надо доставлять в утепленном биксе).
В нативном препарате трихомонады легко отличаются от лейкоцитов и других
клеток по движению, а также по наличию жгутов и ундулирующей мембраны.
Более четко трихомонады видны при исследовании в темном поле или при фазово-
контрастной микроскопии. В несвежем или подсохшем мазке трихомонады быстро
прекращают свое движение, и в таком случае их определение становится
практически невозможным.
Для диагностики трихомонадного поражения из исследуемого материала в
процедурном кабинете готовят мазки и направляют в лабораторию, где их после
подсушивания фиксируют и красят по Романовскому.
В окрашенных препаратах достаточно четко выявляются особенности
морфологии трихомонад, что наряду с неограниченным временем исследования (в
противоположность нативному мазку, где сроки доставки и микроскопии
ограничены временем сохранения подвижности трихомонад) делает этот метод
достаточно удобным для практических условий.
Окраска по Романовскому дает лучшие результаты в модификации Н. А.
Цагикян (1954). Для этого фиксированный тонкий мазок красят 40 мин краской
следующего состава: воды дистиллированной 100 мл, 1% раствора карбоната
натрия 15 капель и краски Романовского 4 мл. По указанной модификации более
четко красятся жгутики, трихомонады становятся хорошо различимыми. Ядра
окрашиваются в фиолетово-рубиновый или фиолетовый цвет, цитоплазма—в
голубой, жгутики и некоторые другие структурные образования — в розово--
красный.
Повышению эффекта лабораторного исследования способствует просмотр
нативных и окрашенных препаратов.
Список используемой литературы.
1. Генис Д.Е. Медицинская паразитология, М. «Медицина», 1985 г
2. Воробьев А.А. Микробиология и иммунология, М. «Медицина», 1999 г.
3. Коротеев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология, С-
П., 1998 г.
4. Золотницкий В.С. Руководство к практическим занятиям по эпидемиологии
и паразитологии, М. «Медицина», 1975 г.
5. Слюсарев А.А. Биология с общей генетикой, М. «Медицина», 1978 г.
6. Чернес Ф.К. Микробиология, М. «Медицина», 1987 г.
7. Ярыгин В.Н. Биология, М. «Медицина», 1980 г.
