Класс жгутиковые: лейшмании, трихомонады, лямблии, трипаносомы
также в периферической крови. В поздний период лихорадки или по окончании
его трипаносом обнаруживают в пунктате увеличенных лимфатических узлов. В
период проявления симптомов поражения центральной нервной системы
паразитов, в крови и в лимфатических узлах нет. На этой стадии болезни
более эффективно исследование спинномозговой жидкости.
[pic]
Для обнаружения трипаносом исследуют свежие или окрашенные препараты. В
первом случае каплю крови, смешанную с цитратом, пунктат лимфатического
узла или спинномозговой жидкости помещают на предметное стекло, накрывают
покровным стеклом и микроскопируют. Подвижных трипаносом можно заметить
даже при малом увеличении микроскопа, хотя лучше их видно при большом
увеличении. Более распространенным является исследование постоянных
окрашенных по Романовскому препаратов, для чего готовят мазки и толстые
капли обычным способом. В окрашенных препаратах трипаносомы легко
распознаются среди клеточных элементов. При окраске по Романовскому тело
трипаносом окрашивается в голубоватый цвет, ядро и жгуты— в красный. На
препарате можно видеть мембрану, соединяющую волнообразно извитой жгутик с
краем тела.
Если в свежих или окрашенных препаратах не удается обнаружить возбудителя,
используют метод заражения лабораторных животных. Наиболее чувствительны к
заражению трипаносомами белые мыши, у которых после введения исследуемого
материала подкожно или внутримышечно уже на 2—3-й день в крови появляются
паразиты.
При американском трипаносомозе возбудитель обнаруживается в острой стадии
болезни в периферической крови в свежих или окрашенных по Романовскому
препаратах. Однако по сравнению с африканской формой болезни число
трипаносом здесь значительно меньше, поэтому требуется просматривать
большое число препаратов. В хронической стадии паразиты в крови встречаются
очень редко, поэтому исследование периферической крови бывает
малоэффективным. В таких случаях рекомендуется заражение белых мышей или
морских свинок, а также посевы на питательные среды. С целью диагностики
используют серологические реакции: связывания комплемента, агглютинации,
флюоресцирующих антител.
Лямблии
Строение.
Лямблия (Lamblia intestinalis) впервые была описана русским ученым Д. Ф.
Лямблем (1859), в честь которого она и получила свое название.
Лямблия существует в виде вегетативной формы (трофозоит) и цисты (рис. 10).
Вегетативная форма активная, подвижная, грушевидная, передний конец тела
закруглен, задний заострен. Длина 9—18 мкм. В передней части тела находится
присасывательный диск в виде углубления. Имеет 2 ядра, 4 пары жгутиков.
Жгутики, проходя частично в цитоплазме, образуют два хорошо видимых при
окраске продольных пучка.
[pic]
Рис № 10 Лямблии
При наблюдении в живом состоянии движение очень характерное, паразит все
время переворачивается боком за счет вращательного движения вокруг
продольной оси. В препарате при комнатной температуре лямблии быстро
погибают. Пищу всасывают всей поверхностью. Размножаются продольным
делением.
Цисты — это неподвижные неактивные формы паразита. Длина 10—14 мкм. Форма
овальная. Оболочка сравнительно толстая, хорошо очерчена, часто в
значительной своей части как бы отслоена от тела самой цисты. Этот признак
помогает отличать цисты лямблий от других сходных образований.
В растворе Люголя окрашиваются в желтовато-коричневатый цвет. Окрашивание
позволяет видеть в зрелой цисте 4 ядра.
Цикл развития.
Обитают в верхнем отделе тонкого кишечника. С помощью присасывательного
диска прикрепляются к ворсинкам. В желчном пузыре лямблий не живут, так как
желчь на них действует губительно. Частое обнаружение их при дуоденальном
зондировании объясняется тем, что лямблий попадают в содержимое
двенадцатиперстной кишки с ее стенок.
Обычно вегетативные формы с испражнениями не выделяются, однако при
поносах их можно обнаружить в свежевыделенных жидких фекалиях. Лямблий,
попадая в нижние отделы кишечника, где условия для них неблагоприятные,
превращаются в цисты, которые и выделяются обычно с испражнениями.
Цисты хорошо сохраняются во внешней среде, в зависимости от влажности и
окружающей температуры — до месяца; при высушивании погибают очень быстро.
Заражение может произойти через загрязненные руки, игрушки, пищу и воду.
Цисты, попадая в кишечник, превращаются там в вегетативные формы. Одна
циста образует две вегетативные формы.
Клиника.
Лямблии распространены очень широко, особенно часто они встречаются у
детей. По мнению некоторых ученых, лямблии, особенно при большом их числе,
могут вызывать механическое раздражение слизистой оболочки кишечника, в
определенной степени затруднять всасывание жиров и жирорастворимых
витаминов. При этом могут возникать нерезкие боли в животе, расстройство
стула, снижение аппетита, иногда боли в правом подреберье (лямблиоз). В
некоторых случаях лямблии могут ухудшить течение других заболеваний
кишечника и желчных путей. Ряд ученых считают лямблии непатогенными. Таким
образом, вопрос о патогенности лямблии в настоящее время окончательно не
решен.
Диагностика.
Обнаружить лямблии у зараженного человека обычно сравнительно легко.
.
Исследование желчи.
Желчь и содержимое двенадцатиперстной кишки, полученные при дуоденальном
зондировании, осматривают и выбирают комочки слизи на предметное стекло и
микроскопируют. Кроме того, материал центрифугируют, просматривают под
микроскопом осадок. Этим методом можно обнаружить вегетативные стадии
лямблий. В свежевыделенном материале, полученном при дуоденальном
зондировании, можно обнаружить подвижные вегетативные формы.
Исследование испражнений/
Сбор материала. Фекалии исследуют с целью обнаружения простейших
кишечника.
Движение простейших — одно из самых характерных и отличительных свойств,
которое позволяет поставить правильный диагноз. Поэтому основное правило,
которое необходимо неукоснительно выполнять — это подвергать исследованию
только свежий материал. Промежуток времени от момента выделения до
исследования не должен превышать 30 мин., т. е. в лабораторию должны
доставляться фекалии в теплом виде. Под термином “теплые фекалии” надо
понимать фекалии, не остывшие после выделения их из организма, но отнюдь не
подогретые искусственно. Исследование оформленных испражнений допускается в
течение 2 ч после выделения.
Исследуемый материал собирают в чистую сухую посуду. Наиболее подходящими
для этой цели являются картонные парафинированные стаканчики, которые после
одноразового использования сжигают. Если фекалии собирают в стеклянную или
фарфоровую посуду, то перед употреблением ее стерилизуют кипячением.
Вегетативные формы простейших весьма чувствительны к химическим
веществам, и если в посуде, куда собирают : фекалии, остаются следы
дезинфицирующих веществ, простейшие быстро погибают и распознавание их
становится трудным, а иногда и невозможным.
Доставленный в лабораторию материал прежде всего подвергают
макроскопическому осмотру. При этом отмечают консистенцию кала, наличие
слизи и крови. Если в лабораторию доставлено одновременно несколько проб
фекалий, в первую очередь подлежат исследованию неоформленные фекалии с
патологическими примесями/
Сохранять пробу до исследования надо при обычной температуре в вытяжном
шкафу. Помещать в термостат не следует, так как при повышенной температуре
быстрее происходит размножение бактерий, больше образуется продуктов
метаболизма, что приводит к быстрой дегенерации простейших.
При каждом анализе испражнений с целью обнаружения простейших кишечника
обязательным является исследование нативного препарата и мазка, окрашенного
раствором Люголя.
Нативный мазок. Жидкие кровянисто-слизистые испражнения без видимой
примеси фекальных масс могут быть исследованы без добавления изотонического
раствора хлорида натрия. Деревянной палочкой каплю испражнений переносят на
предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Пользоваться стеклянными
палочками не рекомендуется, так как ими невозможно набирать слизистые
комочки, в которых находятся простейшие. Правильно приготовленный препарат
должен быть опрятным, покровное стекло должно плотно прилегать к
предметному с равномерным распределением жидкости между стеклами без ее
выступания за пределы покровного стекла. Мазок должен быть умеренной
толщины. Густой мазок малопрозрачен и его трудно микроскопировать, если же