Структура и функции клеточного ядра
хромосомы), но могут встречаться хромосомы дицентрические и
полицентрические.
Некоторые хромосомы имеют вторичную перетяжку. Последняя обычно
расположена вблизи дистального конца хромосомы и отделяет маленький
участок, спутник. Вторичные перетяжки называют, кроме того, ядрышковыми
организаторами, так как именно на этих участках хромосом в интерфазе
происходит образование ядрышка. Здесь же локализована ДНК, ответственная за
синтез рРНК.
Плечи хромосом оканчиваются теломерами, конечными участками. Теломерные
концы хромосом не способны соединяться с другими хромосомами или их
фрагментами, в отличие от концов хромосом, лишенных теломерных участков,
которые могут присоединяться к таким же разорванным концам других хромосом.
Размеры хромосом у разных организмов варьируют в широких пределах. Так,
длина хромосом может колебаться от 0,2 до 50 мкм. Самые мелкие хромосомы
обнаруживаются у некоторых простейших, грибов. Наиболее длинные - у
некоторых прямокрылых насекомых, у амфибий и у лилейных. Длина хромосом
человека находится в пределах 1,5-10 мкм.
Число хромосом у различных объектов тоже значительно колеблется, но
характерно для каждого вида. У некоторых радиолярий число хромосом
достигает 1000-1600. Рекордсменом среди растений по числу хромосом (около
500) является папоротник ужовник, 308 хромосом у тутового дерева, у речного
рака 196 хромосом. Наименьшее количество хромосом (2 на диплоидный набор)
наблюдается у одной из рас аскариды, у сложноцветного Haplopappus gracilic
- всего 4 хромосомы (2 пары).
Совокупность числа, величины, величины и морфологии хромосом называется
кариотипом данного вида. Даже у близких видов хромосомные наборы отличаются
друг от друга или по числу хромосом, или по величине хотя бы одной или
нескольких хромосом. Следовательно, структура кариотипа может быть
таксономическим признаком.
Ядрышко
Практически во всех живых клетках эукариотических организмов в ядре видно
одно или несколько обычно округлой формы тельц, сильно преломляющих свет, -
это ядрышки, или нуклеолы.
Ядрышко - не самостоятельная структура или органоид. Оно - производное
хромосомы, один из ее локусов, активно функционирующий в интерфазе.
В процессах синтеза клеточных белков ядрышко клетки является местом
образования рибосомных РНК и рибосом, на которых происходит синтез
полипептидных цепей.
Количество ядрышек в клетке
Начиная с зеленых водорослей, грибов и низших простейших и кончая высшими
организмами, все клетки имеют обязательные внутриядерные структуры -
ядрышки. Это правило имеет большое число исключений, которые только
подчеркивают важность и необходимость ядрышка в жизненном цикле клетки. К
таким исключениям относятся клетки дробящихся яиц, где ядрышки отсутствуют
на ранних этапах эмбриогенеза, или клетки закончившие развитие и необратимо
специализировавшиеся, например, некоторые клетки крови.
Количество ядрышек в клетке может меняться, однако их число на ядро
зависит от генного баланса клетки. Было найдено, что в образовании ядрышек
участвуют определенные места некоторых хромосом, связь которых с ядрышком
можно хорошо проследить в телофазе и профазе. Такие хромосомы, как правило,
имеют вторичные перетяжки, зоны которых представляют собой места, где идет
развитие ядрышек. Мак Клинток (1934) назвал эти участки хромосом
“ядрышковыми организаторами”.
Места вторичных перетяжек особенно характерны для расположения ядрышковых
организаторов, но последние иногда могут находиться на концах хромосом или
в нескольких местах по длине хромосомы.
Общее число ядрышек на ядро определяется числом ядрышковых организаторов
и увеличивается согласно плоидности ядра. Однако часто количество ядрышек
на ядро бывает меньше числа ядрышковых организаторов. Было показано, что
ядрышки могут сливаться; кроме того, в образовании одного ядрышка иногда
участвует несколько организаторов.
Еще в работах М.С.Навашина (1934) было показано, что хромосомный локус,
который в нормальных условиях образует крупное ядрышко, становится
неактивным, когда после гибридизации в ядре появляется более “сильный”
локус на другой хромосоме. Тот факт, что в определенных условиях может
подавляться активность одних ядрышковых организаторов или же повышаться
активность других, бывших до этого в латентном, скрытом состоянии,
указывает на то, что в клетках поддерживается определенный баланс
количества ядрышкового материала или, другими словами, регулируется
“валовая” продукция, выдаваемая ядрышками.
Исходя из перечисленных выше фактов, можно сделать следующие заключения:
= образования ядрышек и их число связаны с активностью определенных
участков хромосом - ядрышковых организаторов, которые расположены
большей частью в зонах вторичных перетяжек;
= изменения в числе ядрышек в клетках данного типа могут происходить за
счет слияния ядрышек или за счет сдвигов в хромосомном балансе клетки.
Физиология и химия ядрышка
Ядрышко по сравнению с другими компонентами клетки характеризуется как
самая плотная структура с наиболее высокой концентрацией РНК, с чрезвычайно
высокой активностью в отношении синтеза РНК.
Концентрация РНК в ядрышках всегда выше концентрации РНК в других
компонентах клетки, так концентрация РНК в ядрышке может быть в 2-8 раз
выше, чем в ядре, и в 1-3 раза выше, чем в цитоплазме. Отношение
концентрации РНК в ядре, ядрышке и цитоплазме клеток печени мыши составляет
1:7,3:4,1, в клетках поджелудочной железы - 1:9,6:6,6.
В ядрышке не обнаруживается ДНК, но все же при исследовании фиксированных
клеток вокруг ядрышка всегда выделяется зона хроматина. Этот
околоядрышковый хроматин, по данным электронной микроскопии,
представляется, как интегральная часть сложной структуры ядрышка.
Ядрышко - одно из самых активных мест в клетке по включению
предшественников в РНК. Ядрышковая РНК является предшественником
цитоплазматической РНК.
Цитоплазматическая РНК синтезируется в ядрышке.
РНК ядрышек
Оценивая общее содержание в ядрышковых фракциях белков, РНК и ДНК, можно
видеть, что на долю РНК приходится около 10% всей массы ядрышка.
Содержание РНК, ДНК и белка в изолированных ядрышках (сухой вес в %)
|Объект |РНК |ДНК |Белок|РНК/ДН|
| | | | |К |
|Печень крысы |11,0 |8,0 |78,0 |1,4 |
|Регенерирующая печень (6|7,6 |4,6 |87,8 |1,7 |
|ч) | | | | |
|Регенерирующая печень |15,5 |5,4 |79,1 |2,9 |
|(18 ч) | | | | |
|Печень морской свинки |4,1 |9,5 |86,4 |0,43 |
|Стебель гороха (4 дня) |15,11|10,6 |74,0 |1,5 |
|Проростки гороха (36 ч) |16,7 |6,4 |76,9 |2,6 |
Так как основную массу цитоплазматической РНК составляет рибосомная РНК,
то можно сказать, что ядрышковая РНК принадлежит к этому классу.
Подтверждением представлений того, что именно ядрышко является местом
синтеза рРНК и образования рибосом, послужило то, что из ядрышковых
препаратов были выделены РНП-частицы, которые как по составу РНК (по
седиментационным свойствам), так и по размеру можно охарактиризовать как
рибосомы или их предшественники с различными коэффициентами седиментации.
ДНК ядрышек
Биохимическими исследованиями обнаружено в выделенных ядрышках
определенное количество ДНК, которую можно отождествить с околоядрышковым
хроматином или с ядрышковыми организаторами хромосом. Содержание ДНК в
выделенных ядрышках - 5-12% от сухого веса и 6-17% от всей ДНК ядра.
ДНК ядрышкового организатора - это та самая ДНК, на которой происходит
синтез ядрышковой, т.е. рибосомной, РНК.
Таким образом из биохимических работ появились представления о том, что в
ядрышке на ДНК локализованы многочисленные одинаковые гены для синтеза
рРНК. Синтез рРНК идет путем образования огромного предшественника и
дальнейшего его превращения (созревания) в более короткие молекулы РНК для
большой и малой субъедениц рибосом.
Изучая ядрышки ооцитов тритонов, исследователи столкнулись с интересным
явлением - сверхчисленностью ядрышек. У X. laevis во время роста ооцита
появляется до 1000 мелких ядрышек, не связанных с хромосомами. Именно эти
ядрышки выделил О.Миллер. вместе с этим на ядро ооцита увеличивается
количество рДНК. Это явление получило название амплификации. Оно
заключается в том, что происходит сверхрепликация зоны ядрышкового
организатора, многочисленные копии отходят от хромосом и становятся
дополнительно работающими ядрышками. Такой процесс необходим для накопления
огромного (1012) количества рибосом на яйцевую клетку, что обеспечит в
будущем развитие эмбриона на ранних стадиях даже при отсутствии синтеза
новых рибосом. Сверхчисленные ядрышки после созревания яйцевой клетки
исчезают.
Ультраструктура ядрышек
При изучении большого числа различных клеток животных и растений отмечена
волокнистая или сетчатая структура ядрышек, заключенная в более или менее
плотную диффузную массу. Были предложены названия для этих частей:
волокнистая часть - нуклеонема и диффузная, гомогенная часть - аморфное
вещество, или аморфная часть. Сделанные почти одновременно с этим
электронно-микроскопичес-кие исследования также выявили волокнисто-нитчатое
строение ядрышек.
Однако такое нитчатое строение ядрышка не всегда четко выражено. У
некоторых клеток отдельные нити нуклеонем сливаются, и ядрышки могут быть
совершенно однородными.
При более пристальном изучении ядрышка можно заметить, что основные
структурные компоненты ядрышка - плотные гранулы диаметром около 15 нм и
тонкие фибриллы толщиной 4-8 нм. Во многих случаях (ооциты рыб и амфибий,
меристематические клетки растений) фибриллярный компонент собран в плотную
центральную зону (сердцевина), лишенную гранул, а гранулы занимают
переферическую зону ядрышка. В ряде случаев (например, клетки корешков
растений) в этой гранулярной зоне не наблюдается никакой дополнительной
структуризации.
Было найдено, что аморфные участки ядрышек неоднородны. В их структуре
выявляются малоокрашенные зоны - фибриллярные центры - и окружающие их
более темные участки, тоже имеющие фибриллярное строение.
Кроме этих двух компонентов ядрышек в последнее время большое внимание
уделялось строению околоядрышкового хроматина. Этот хроматин и
внутриядрышковая сеть ДНК являются единой системой и представляют собой
интегральный компонент ядрышка.
Гранулы и фибриллярная часть состоят из рибонуклеопротеидов.
Показано, что именно светлые фибриллярные центры содержат рДНК.
Судьба ядрышка при делении клеток
Известно, что ядрышко исчезает в профазе и появляется вновь в средней
телофазе.
По мере затухания синтеза рРНК в средней профазе происходит разрыхление
ядрышка и выход готовых рибосом в кариоплазму, а затем и в цитоплазму. При
конденсации профазных хромосом фибриллярный компонент ядрышка и часть
гранул тесно ассоциируют с их поверхностью, образуя основу матрикса
митотических хромосом. Этот фибриллярно-гранулярный материал,
синтезированный до митоза, переносится хромосомами в дочерние клетки.
В ранней телофазе по мере деконденсации хромосом происходит высвобождение
компонентов матрикса. Его фибриллярная часть начинает собираться в мелкие
многочисленные ассоциаты - предъядрышки, которые могут объединяться друг с
другом. По мере возобновления синтеза РНК предъядрышки претерпевают
перестройку, что выражается в появлении в их структуре гранул РНК, а затем
в становлении дефинитивной формы нормально функционирующего ядрышка.
Роль ядра.
Ядро осуществляет две группы общих функций: одну, связанную собственно с
хранением генетической информации, другую - с ее реализацией, с
обеспечением синтеза белка.
В первую группу входят процессы, связанные с поддержанием наследственной
информации в виде неизменной структуры ДНК. Эти процессы связаны с наличием
так называемых репарационных ферментов, ликвидирующих спонтанные
повреждения молекулы ДНК (разрыв одной из цепей ДНК, часть радиационных
повреждений), что сохраняет строение молекул ДНК практически неизменным в
ряду поколений клеток или организмов. Далее, в ядре происходит
воспроизведение или редупликация молекул ДНК, что дает возможность двум
клеткам получить совершенно одинаковые и в качественном и в количественном
смысле объемы генетической информации. В ядрах происходят процессы
изменения и рекомбинации генетического материала, что наблюдается во время
мейоза (кроссинговер). Наконец, ядра непосредственно участвуют в процессах
распределения молекул ДНК при делении клеток.
Другой группой клеточных процессов, обеспечивающихся активностью ядра,
является создание собственно аппарата белкового синтеза. Это не только
синтез, транскрипция на молекулах ДНК разных информационных РНК и
рибосомных РНК. В ядре эукариотов происходит также образование субъедениц
рибосом путем комплексирования синтезированных в ядрышке рибосомных РНК с
рибосомными белками, которые синтезируются в цитоплазме и переносятся в
ядро.
Таким образом, ядро представляет собой не только вместилище генетического
материала, но и место, где этот материал функционирует и воспроизводится.
Поэтому выпадение лил нарушение любой из перечисленных выше функций
губительно для клетки в целом. Так нарушение репарационных процессов будет
приводить к изменению первичной структуры ДНК и автоматически к изменению
структуры белков, что непременно скажется на их специфической активности,
которая может просто исчезнуть или измениться так, что не будет
обеспечивать клеточные функции, в результате чего клетка погибает.
Нарушения редупликации ДНК приведут к остановке размножения клеток или к
появлению клеток с неполноценным набором генетической информации, что также
губительно для клеток. К такому же результату приведет нарушение процессов
распределения генетического материала (молекул ДНК) при делении клеток.
Выпадение в результате поражения ядра или в случае нарушений каких-либо
регуляторных процессов синтеза любой формы РНК автоматически приведет к
остановке синтеза белка в клетке или к грубым его нарушениям.
Значение ядра как хранилища генетического материала и его главная роль в
определении фенотипических признаков были установлены давно. Немецкий
биолог Хаммерлинг одним из первых продемонстрировал важнейшую роль ядра. Он
выбрал в качестве объекта своих экспериментов необычайно крупную
одноклеточную (или неклеточную) морскую водоросль Acetabularia. Существует
два близко родственных вида A. medierranea и A. crenulata, различающихся
только по форме “шляпки”.
В ряде экспериментов, в том числе таких, в которых “шляпку” отделяли от
нижней части “стебелька” (где находится ядро), Хаммерлинг показал, что для
нормального развития шляпки необходимо ядро. В дальнейших экспериментах, в
которых соединяли нижнюю часть, содержащую ядро одного вида с лишенным ядра
стебельком другого вида, у таких химер всегда развивалась шляпка, типичная
для того вида, которому принадлежит ядро.
При оценке этой модели ядерного контроля следует, однако, учитывать
примитивность организма, использованного в качестве объекта. Метод
пересадок был применен позднее в экспериментах, проведенных в 1952 г. двумя
американскими исследователями, Бриггсом и Кингом, с клетками лягушки Rana
pipenis. Эти авторы удаляли из неоплодотворенных яйцеклеток ядра и заменяли
их ядрами из клеток поздней бластулы, уже проявлявших признаки
дифференцировки. Во многих случаях из яиц реципиентов развивались
нормальные взрослые лягушки.
Литература:
Свенсон К., Уэбстер П. “Клетка”. М., Мир, 1980.
Де Робертис Э. Новинский В., Саэс Ф. “Биология Клетки”. М., Мир, 1971
Ченцов Ю.С., Поляков В.Ю. “Ультраструктура клеточного ядра”. М., Наука,
1974
Зегнбуш П. “Молекулярная и клеточная биология”. М., Мир, т.1,2, 1982
При подготовке реферата были использованы материалы, полученные из
Всемирной Биологической Сети (BIOSCI) посредством сети Internet.
